虎耳兰的生物特性
组织培养由于具有繁殖系数高,快速,可得到无病毒株等优点,在花卉苗木生产上多被采用。虎耳兰是石蒜科网球花属鳞茎植物,又名白花虎耳兰,白花网球花,白花画刷花,原产非洲南部,虎耳兰既可观花又可观叶,上海地区初冬开花,花期可长达2个月,其花,叶娇嫩,秀丽大方,植株周年常绿,非常适于室内盆栽观赏。常用分株或播种繁殖,但上海地区不能产生种子,繁殖非常慢。为快速繁殖提供了一条新的可能途径,外植体分化选择生长旺盛的盆栽虎耳兰植株中春季萌发的幼嫩叶片,用自来水冲洗干净,然后在超净台上用75%酒精润洗30,用无菌水冲洗2次,再于饱和漂白粉溶液中振荡洗涤20,最后用无菌水冲洗3~4次后用无菌滤纸吸干,将叶片切成0.5的外植体块,接种于+0.65%琼脂+3%蔗糖+不同6一和浓度配比的诱导培养基中。每处理接种40块,重复3次。
6一和组合如下:'一1:6一0.5/(单位下同)+0.2;一2:6一0.5+1.0;一3:6一0.5+2.0;一4:6一1.0+1.0;一5:6一2.0+1.0;一6:6一3.0+1.0;一7;6一2.0+0.1;1—8:6一3.0+0.1.1.3壮苗增殖将带有不定芽的外植体块切割成小块,接种到+0.65%琼脂+3%蔗糖+不同6一和浓度配比+不同浓度的培养基上,每种培养基接种20块,重复3次。6一和比例及浓度组合女Ⅱ下:一1:6一2.0+0.;一2:6一2.0+0.1+0.2%;一3:6一0.5+2.0。
统计不定芽的增殖倍数(增殖倍数=总芽数/接种芽数),观察不定芽生长情况。1.4生根在无菌条件下,取以一2培养基获得的长势基本一致的2.5以上的无根试管苗,接种在1/2+0.65%琼脂+1.5%蔗糖+不同浓度的或+不同浓度的培养基中,每种培养基接种66株,重复3次。培养20后统计各培养基中试管苗的生根率,40后测定根的生长指标(根数,根长,根冠比).或浓度及浓度组合如下:一1:0.2;一2:0.2+0.2%;一3:0.2;一4:0.2+0.2%.1.5移栽苗长出旺盛的根后,在室温下开瓶炼苗21,直接移栽入1/3泥炭+2/3沙壤土的花盆中;或在室温下炼苗2后,先移入(泥炭):(珍珠岩):(蛭石)=4:2:1的基质中,浇施0.1%溶液(加几滴),一周后再移入1/3泥炭+2/3沙壤土的花盆中。
以上培养基值调至5.8左右;培养温度25±2,光照强度1500~2000,每日光照1211.2结果与分析2.1不定芽的诱导将外植体块分别接种到一1,一2,一3,一4,一5,一6,一7,一8培养基上,约15后外植体均有明显增厚膨大。继续培养7后,外植体切口处出现少量愈伤组织,再继续培养7,在一7,一8培养基上的外植体上形成了不定芽。
在一1,一2,一3,一4,一5,一6培养基上出现的少量愈伤组织继续长大,在外植体四周形成明显增大的愈伤组织块,再继续培养30,一1,一2,一3培养基上的愈伤组织块分化出少量的不定芽,而一4,一5,一6培养基上的愈伤组织块继续长大,若再继续培养多逐渐褐化,极少能分化出不定芽,有些还出现了不定根的分化.统计以上培养基外植体的不定芽诱导率[不定芽诱导率=出芽的外植体数/(接种的外植体数一污染的外植体数),并观察不定芽的诱导情况。
虎耳兰的组织培养229注:一出芽极少,长势差;+出芽较少,长势一般;++出芽稍多,长势稍好;+++出芽多,长势较好,但有白化苗;++++出芽多生长旺盛,无白化苗(下表均同):一.+.++,+十+,++++()?由表1可知,不同6一和组合对不定芽诱导率差异显着培养基一8和一7显着增加了不定芽的诱导率,不定芽诱导率达到100%和95%,但前者不定芽的生长势比后者差。
分析结果认为,培养基1—7即6一和浓度分别为2.0和0.1时最有利于虎耳兰不定芽的诱导.2.2不定芽增殖培养基的筛选由表2可知,一1和一2培养基显着增加了不定芽增殖倍数,其中一2培养基中不定芽发育良好。呈深绿色,生长健壮,旺盛,经几次继代后,可形成大量不定芽;一1培养基中的不定芽长势较一2为差,黄绿色,生长较慢;一3培养基显着降低了不定芽增殖倍数,同时愈伤组织易分化根再继续培养一段时间。